国家开放大学24春《养牛技术》实验实习3[答案]

国家开放大学24春《养牛技术》实验实习3[答案]
实习十 牛奶卫生质量检验
 一、实习目的
　　使学生掌握常用的牛奶卫生质量指标的测定方法。
　　二、牛奶中细菌计数
　　（一）测定原理
　　将牛奶稀释，接种在适当培养基上，在温箱中培养后计数菌落数。本方法假定一个菌落是由一个菌体分裂生长而成。然后根据菌落数和牛奶稀释倍数转换为每毫升牛奶中的细菌数。
　　（二）仪器设备与试剂
　　仪器设备包括无菌操作台、培养箱、高压灭菌锅、培养皿及三角瓶和培养基与待测牛奶。
　　（三）操作方法
　　培养基可以购买，也可以自己制作。制作方法是：称取蛋白胨10g，琼脂15～20g，牛肉膏3g，氯化钠5g。将上述物质倒入1000ml蒸馏水中，搅拌、加热至完全溶解。将pH值调节至7.2～7.4，过滤，分装于烧瓶中。在121℃条件下，加热15～20分钟进行消毒。
　　将250 ml 三角瓶、平皿、25ml移液管、10ml移液管、1ml移液管、生理盐水及试管进行灭菌处理。取25ml牛奶样品，置入装有225ml灭菌生理盐水的250ml三角瓶中，混匀。在取1ml混匀液，置于有9ml灭菌生理盐水的试管中，混匀。再取第二次稀释液1ml，置于有9ml灭菌生理盐水的试管中。如此重复，使牛奶的稀释倍数达到10000倍。将灭菌处理约45℃的培养琼脂倒入平皿中约15ml，吸取1ml经稀释10000倍的牛奶样品，接种于平皿中，静置。待冷却凝固后，置入36℃培养箱中培养48小时。对平皿中的菌落数进行计数，并换算为每毫升牛奶中的细菌数。
　　三、奶牛隐性乳房炎检测——CMT法（加州乳房炎试验）
　　（一）原理
　　烷基丙烯基磺酸盐为表面活性剂，能够使白细胞膨胀。NaOH能够加速细胞电荷的改变。在电荷发生改变的条件下，变性细胞凝结。
　　（二）仪器与试剂
　　诊断盘，为白色塑料盘，上有四个深约1.5cm、直径为5cm的圆形小室。试剂可以购买，也可以自己配制。配制方法是，称取NaOH15g、烷基丙烯基磺酸盐45g、溴甲酚紫0.1g，将上述药品溶解于1000ml蒸馏水中，混匀。
　　（三）检测方法
　　从奶牛四个乳区中分别取奶样2ml，分别置于诊断盘的4个小室中，分别加入2ml诊断试剂，呈同心轴摇动，使牛奶样品和诊断试剂混匀，然后根据有关判断标准确定奶牛乳房炎情况。
　　（四）CMT判定标准



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